Kartoffel-Dextrose-Agar (PDA) ist ein gutes halbfestes Allzweckmedium, das zur Kultivierung von Pilzen verwendet wird. Es wird oft verwendet, um pilzbildende Arten zu isolieren, zu züchten und zu erhalten. Fertige Petrischalen oder Reagenzgläser, die PDA enthalten, können gekauft werden, oder PDA kann unter Verwendung einer handelsüblichen Vormischung schnell hergestellt werden. Es ist jedoch nicht schwer, eine einfache und effektive Version ohne großen Aufwand von Grund auf neu zu erstellen.
Kredit: Zedcor ganz im Besitz / PhotoObjects.net / Getty ImagesKartoffelextrakt zubereiten
Schritt 1
Kartoffeln in einen Topf mit ca. 1,2 l Leitungswasser geben und 1 Stunde auf einem Herd kochen.
Schritt 2
Nehmen Sie den Topf vom Herd und lassen Sie die Flüssigkeit abkühlen, bis sie bequem gehandhabt werden kann (ca. 10 Minuten).
Schritt 3
Gießen Sie flüssigen Kartoffelextrakt durch ein Sieb oder ein Käsetuch und sammeln Sie ihn in einem anderen Behälter.
Medium vorbereiten
Schritt 1
Fügen Sie Dextrose und Agar zu 1 Liter Kartoffelextraktwasser hinzu.
Schritt 2
Testen Sie den pH-Wert der Lösung mit einem pH-Testpapier oder einem pH-Meter.
Schritt 3
Wenn der pH-Wert über 6,5 liegt, stellen Sie ihn ein, indem Sie jeweils einen Tropfen der Salzsäurelösung zugeben und erneut testen.
Schritt 4
Wenn der pH-Wert unter 6 liegt, stellen Sie ihn ein, indem Sie jeweils einen Tropfen Natriumhydroxidlösung zugeben und erneut testen.
Sterilisation
Schritt 1
Mischen Sie das Medium gründlich und teilen Sie es in kleinere Chargen von 250 ml auf, die in die vier 500-ml-Kolben gegossen werden (Hinweis: Jeder Kolben darf nicht mehr als die Hälfte gefüllt sein, um ein Überkochen zu vermeiden).
Schritt 2
Decken Sie jeden Kolben mit einem Stück locker gekräuselter Aluminiumfolie ab, damit die Folie nicht abfällt, aber nicht dicht verschließt.
Schritt 3
Stellen Sie die Flaschen in einen Schnellkochtopf.
Schritt 4
Betreiben Sie den Schnellkochtopf gemäß den Anweisungen des Herstellers, um den PDA 15 Minuten lang bei 121 ° C und einem Druck von 103.421 Pascal (15 PSI) zu sterilisieren.
Schritt 5
Schalten Sie den Schnellkochtopf aus und lassen Sie ihn wieder auf Atmosphärendruck kommen. Nehmen Sie dann die Kolben heraus und lassen Sie sie abkühlen, bis sie gehandhabt werden können.
Gießen des Mediums
Schritt 1
Richten Sie die sterilen Petrischalen auf einer ebenen Fläche aus.
Schritt 2
Sobald die Kolben auf die Handhabungstemperatur abgekühlt sind, aber bevor sich das Medium zu verfestigen beginnt, fassen Sie einen Kolben mit einer Hand und nehmen Sie den Foliendeckel ab und legen Sie ihn mit der anderen Hand beiseite.
Schritt 3
Heben Sie für jede Petrischale den Deckel mit einer Hand an, füllen Sie ihn schnell zur Hälfte mit flüssigem PDA und setzen Sie den Deckel wieder auf.
Schritt 4
Wiederholen Sie Schritt 3, bis alle Petrischalen gefüllt sind.
Schritt 5
Wenn noch ein PDA übrig ist, nehmen Sie den Kolben mit dem Originalfoliendeckel locker heraus, lassen Sie ihn abkühlen und fest werden, ziehen Sie den Foliendeckel fest und lagern Sie ihn im Kühlschrank.
